技術小知識:被冷凍後的試劑盒質量會(hui) 受損嗎?
我們(men) 知道,完整的ELISA試劑盒包含:
①酶的底物;
②已包被抗原或抗體(ti) 的固相載體(ti) (免疫吸附劑);
③酶標記的抗原或抗體(ti) (結合物);
④結合物及標本的稀釋液;
⑤洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為(wei) 含0.05%吐溫20磷酸緩衝(chong) 鹽水;
⑥陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控製血清(定量測定中);
⑦酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為(wei) 硫酸,其濃度按加量及比色液的體(ti) 積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
那麽(me) 被冷凍後的試劑盒質量會(hui) 受損嗎?景源實驗為(wei) 您解答:
為(wei) 其保存後可以使用,但不能反複凍融,如果您在一周之內(nei) 做實驗,可以2-8℃保存;如果您在一周至一個(ge) 月之內(nei) 做實驗,可以-20℃保存如果您在一個(ge) 月以上做實驗,可以-80℃保存。但是值得注意的是凍融一次比2-8℃保存損失的更大損失主要是蛋白的降解,凍融一次蛋白都有降解。
在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應一般在37℃經1~2小時,產(chan) 物的天生可達ding峰。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置於(yu) 操縱台上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體(ti) 結合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀(yi) 器附有特製的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置於(yu) 水浴箱中,ELISA板底應貼著水麵,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應嚴(yan) 格限製在劃定的範圍內(nei) ,尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細操縱時可根據仿單的要求控製溫育。
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